伯樂 GelDoc XR+ 凝膠成像系統(tǒng)使用說明書。本說明將包含系統(tǒng)介紹、快速上手指南、詳細(xì)操作流程、軟件使用要點(diǎn)以及維護(hù)與故障排查。

一、伯樂 GelDoc XR 凝膠成像系統(tǒng)概述

GelDoc XR+ 是一款高性能的凝膠成像系統(tǒng)，用于對(duì)蛋白質(zhì)凝膠、核酸凝膠、印跡膜等進(jìn)行高靈敏度、高分辨率的圖像采集和分析。其核心特點(diǎn)包括：

1、高分辨率 CCD 相機(jī)：提供清晰的圖像。

2、專業(yè)級(jí)光源：包含透射紫外（UV）、透射白光、側(cè)白光/藍(lán)光（用于染色凝膠如考馬斯亮藍(lán)、SYBR® 安全染料等）。

3、暗箱式設(shè)計(jì)：隔絕環(huán)境光，保證成像質(zhì)量。

4、集成軟件：標(biāo)配 Image Lab™ 軟件，用于圖像采集、分析和定量。

二、伯樂 GelDoc XR 凝膠成像系統(tǒng)主要組件

1、主機(jī)暗箱：包含內(nèi)部樣品臺(tái)、鏡頭、濾鏡輪和光源。

2、高清 CCD 相機(jī)：安裝在暗箱頂部。

3、觸摸屏控制面板：位于暗箱前方，用于快速控制光源、鏡頭對(duì)焦和初步預(yù)覽。

4、電腦工作站：預(yù)裝 Image Lab 軟件。

5、專用紫外防護(hù)眼鏡：使用紫外光源時(shí)必須佩戴！

6、樣品托盤：用于放置凝膠、膜或培養(yǎng)皿。

三、伯樂 GelDoc XR 凝膠成像系統(tǒng)快速入門

目標(biāo)： 快速獲取一張 EB 染色的 DNA 凝膠圖像。

1、準(zhǔn)備與放置樣品：

（1）打開暗箱門，將染好 EB 的瓊脂糖凝膠放在樣品托盤中部。

（2）關(guān)閉暗箱門。

2、使用觸摸屏預(yù)覽和對(duì)焦：

（1）在觸摸屏上，選擇 “UV" 光源圖標(biāo)。

（2）點(diǎn)擊 “Live Preview" （實(shí)時(shí)預(yù)覽）按鈕。系統(tǒng)會(huì)打開紫外燈，并在觸摸屏上顯示圖像。

（3）使用 “Focus" （對(duì)焦）區(qū)域的 “+/-" 按鈕手動(dòng)調(diào)節(jié)焦距，直至條帶清晰。

（4）點(diǎn)擊 “Stop Preview" 停止預(yù)覽。

3、在電腦軟件上采集圖像：

（1）在電腦上打開 Image Lab 軟件。

（2）點(diǎn)擊主界面左上角的 “Capture" （采集）按鈕。

（3）在彈出窗口中選擇合適的預(yù)設(shè)（如 “Ethidium Bromide Gel"）。

（4）點(diǎn)擊 “Start Capture"。圖像會(huì)自動(dòng)采集并顯示在軟件主窗口中。

四、詳細(xì)操作流程

1、步驟 1：開機(jī)

（1）打開電腦，進(jìn)入操作系統(tǒng)。

（2）打開凝膠成像系統(tǒng)主機(jī)背面的電源開關(guān)（暗箱右側(cè)或后方）。

（3）啟動(dòng) Image Lab 軟件。軟件會(huì)自動(dòng)與相機(jī)連接。

2、步驟 2：放置樣品

（1）戴上紫外防護(hù)眼鏡（如需使用紫外光）。

（2）向上輕提并打開暗箱門。

（3）將樣品（凝膠、膜等）平放在樣品臺(tái)中心。對(duì)于小膠，可調(diào)整樣品托盤位置。

（4）確保暗箱門關(guān)閉。

3、步驟 3：選擇成像方法（預(yù)設(shè)）

（1）Image Lab 軟件的核心是 “Protocols"（預(yù)設(shè)）。它自動(dòng)配置了光源、濾鏡、曝光時(shí)間、光圈等所有參數(shù)。

（2）在 “Capture" 窗口左側(cè)，點(diǎn)擊 “Select Protocol"。

（3）從列表中選擇接近你樣品的預(yù)設(shè)：

Ethidium Bromide Gel：用于EB染色的核酸凝膠。

SYBR® Safe Gel：用于SYBR安全染料的凝膠（使用藍(lán)光或白光）。

Stain-Free Gel：用于伯樂熒光免染膠。

Coomassie Blue Gel：用于考馬斯亮藍(lán)染色的蛋白膠（使用白光）。

Chemiluminescence：用于化學(xué)發(fā)光膜（關(guān)閉所有光源，長(zhǎng)時(shí)間曝光）。

Colorimetric：用于比色法膜（如NBT/BCIP，使用白光）。

Multicolor Fluorescence：用于多重?zé)晒狻?/span>

4、步驟 4：預(yù)覽、對(duì)焦與調(diào)整

（1）預(yù)覽：點(diǎn)擊 “Live Preview" 按鈕，軟件會(huì)按預(yù)設(shè)打開光源并顯示實(shí)時(shí)圖像。觸摸屏也可進(jìn)行此操作。

（2）對(duì)焦：

手動(dòng)：使用軟件界面或觸摸屏上的對(duì)焦按鈕。

自動(dòng)：點(diǎn)擊軟件中的 “Auto-Focus" 按鈕。

（3）調(diào)整曝光：

如果條帶過亮/過暗，在預(yù)覽模式下，調(diào)整 “Exposure Time"（曝光時(shí)間）。軟件通常有 “Auto-Expose"（自動(dòng)曝光）按鈕，點(diǎn)擊后可自動(dòng)計(jì)算合適時(shí)間。

也可手動(dòng)調(diào)整光圈（Aperture）或相機(jī)增益（Gain），但初學(xué)者建議使用自動(dòng)或僅調(diào)曝光時(shí)間。

5、步驟 5：采集與保存圖像

（1）確認(rèn)預(yù)覽圖像滿意后，點(diǎn)擊 “Start Capture"（開始采集）。

（2）采集完成后，圖像會(huì)出現(xiàn)在軟件主窗口的 “Image Window"（圖像窗口）中。

（3）立即保存：點(diǎn)擊工具欄的軟盤圖標(biāo) “Save"，或按 Ctrl+S。

建議格式：原始數(shù)據(jù)保存為 .scn 格式（Image Lab 專用，包含所有數(shù)據(jù)）。同時(shí)可另存為 .tiff（用于出版，無壓縮）或 .jpg（用于報(bào)告）。

五、 Image Lab 軟件基礎(chǔ)分析功能

1、泳道與條帶分析（適用于凝膠）：

（1）點(diǎn)擊工具欄的 “Lanes and Bands"（泳道和條帶）圖標(biāo)。

（2）軟件會(huì)自動(dòng)識(shí)別泳道（可手動(dòng)調(diào)整）。點(diǎn)擊 “Bands" 標(biāo)簽，它會(huì)自動(dòng)檢測(cè)條帶。

（3）查看右側(cè)的 “Quantity Table"（定量表），可看到每個(gè)條帶的相對(duì)分子量（MW）、相對(duì)濃度（基于標(biāo)準(zhǔn)曲線或相對(duì)強(qiáng)度）。

2、分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線：

（1）在泳道分析界面，右鍵點(diǎn)擊已知分子量標(biāo)準(zhǔn)的泳道，選擇 “Lane Standard"。

（2）在彈出的對(duì)話框中，輸入各條帶對(duì)應(yīng)的分子量值。

（3）軟件會(huì)自動(dòng)生成標(biāo)準(zhǔn)曲線，并據(jù)此計(jì)算未知樣品的分子量。

3、圖像調(diào)整：

（1）使用 “Adjust Image"（調(diào)整圖像）工具可以調(diào)整圖像的亮度、對(duì)比度、飽和度和銳度。

（2）重要：用于發(fā)表的圖像，所有調(diào)整必須在圖注中說明。定量分析使用原始圖像。

六、安全注意事項(xiàng)與日常維護(hù)

1、安全性

（1）紫外光危害：使用紫外光源時(shí)，必須佩戴隨機(jī)附帶的紫外防護(hù)眼鏡，并避免皮膚直接暴露在紫外燈下。預(yù)覽時(shí)盡量關(guān)閉觀察窗。

（2）化學(xué)品污染：處理含有染料的凝膠時(shí)，需戴手套。避免EB等有害物質(zhì)污染樣品臺(tái)或暗箱內(nèi)部。

（3）電氣安全：保持設(shè)備干燥，清潔前斷開電源。

2、日常維護(hù)：

（1）清潔樣品臺(tái)/托盤：使用后，用柔軟的濕布蘸取溫和清潔劑擦拭，再用清水擦拭干凈。

（2）清潔暗箱內(nèi)部：定期用吹氣球或軟毛刷清除灰塵。

（3）清潔觀察窗/紫外防護(hù)板：使用鏡頭紙或軟布蘸取玻璃清潔劑輕輕擦拭。

（4）相機(jī)鏡頭：非專業(yè)人員請(qǐng)勿自行拆卸清潔。如有灰塵，聯(lián)系工程師。

3、關(guān)機(jī)順序：

（1）關(guān)閉 Image Lab 軟件。

（2）關(guān)閉電腦。

（3）關(guān)閉凝膠成像系統(tǒng)主機(jī)背面的電源開關(guān)。

最后建議：

詳細(xì)手冊(cè)：對(duì)于高級(jí)功能和軟件設(shè)置，請(qǐng)務(wù)必參閱隨機(jī)的 《Image Lab 軟件用戶指南》 PDF。

技術(shù)支持：如遇無法解決的問題，請(qǐng)聯(lián)系伯樂（Bio-Rad）當(dāng)?shù)丶夹g(shù)支持部門，并提供儀器序列號(hào)和軟件版本號(hào)。