以下是為內(nèi)部質(zhì)量控制或定期檢查而設(shè)計的標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟。如果您的移液器用于關(guān)鍵實驗或需要出具認(rèn)證報告，強(qiáng)烈建議送至專業(yè)機(jī)構(gòu)。通過稱量移液器分配的超純水的重量，結(jié)合當(dāng)前溫度下的水密度，計算出實際移液體積，與目標(biāo)體積對比，計算誤差。

一、艾本德十二道移液器校準(zhǔn)前準(zhǔn)備

1、環(huán)境與設(shè)備：

（1）環(huán)境條件： 在無風(fēng)、穩(wěn)定的實驗臺上進(jìn)行。室溫控制在20-25°C，濕度>45%。確保移液器、超純水、天平、容器在同一房間內(nèi)靜置平衡至少1-2小時，使溫度一致。

（2）天平： 使用高精度分析天平（例如，對于10μl量程，天平精度應(yīng)達(dá)到0.001mg；對于100μl及以上，0.01mg即可）。天平必須水平，并經(jīng)過校準(zhǔn)。

（3）液體： 新鮮制備的去離子水/超純水。

（4）（容器： 小型、干凈的稱量容器（如PCR管、小燒杯）。使用前用水潤洗內(nèi)壁，以盡量減少靜電和蒸發(fā)影響。

（5）溫度計： 精確測量水溫和室溫。

（6）數(shù)據(jù)記錄表： 準(zhǔn)備記錄表格。

2、移液器準(zhǔn)備：

（1）確保移液器外觀清潔，無液體殘留。

（2）檢查吸頭推桿、量程鎖等機(jī)械部件是否正常。

（3）使用與移液器匹配的、高質(zhì)量的帶濾芯吸頭，確保氣密性。

二、艾本德十二道移液器校準(zhǔn)步驟

由于是多道移液器，校準(zhǔn)需檢查整排通道的一致性以及單個代表性通道的準(zhǔn)確性。

1、通道一致性測試（快速檢查）

（1）設(shè)定體積： 將移液器設(shè)定到其中間量程（例如，對于10-100μl的移液器，設(shè)為50μl）。

（2）預(yù)潤濕： 安裝新吸頭，吸取并排空水3-5次，使吸頭內(nèi)壁形成穩(wěn)定的水蒸氣飽和層。

（3）一致性測試： 用移液器吸取一排水，然后垂直、緩慢地將所有通道的液體同時排入一個裝有少量水的培養(yǎng)皿或槽中，觀察液滴大小是否均勻一致。如有明顯大小不一，說明通道可能有堵塞或泄漏，需先維護(hù)。

（4）稱重檢查（可選）： 也可以準(zhǔn)備一個長條形容器，在分析天平上逐排稱量每排分配的水重（需快速操作），粗略比較各排體積是否一致。

2、單通道精確校準(zhǔn)（稱重法）

選擇中間位置的一個通道（如第6道） 作為代表性通道進(jìn)行詳細(xì)校準(zhǔn)。

（1）設(shè)定校準(zhǔn)點： 通常選擇三個點：

接近最小量程（如滿量程的10%）

中間量程（約50%）

接近MAX量程（100%）

例如：對于10-100μl移液器，可選擇10μl， 50μl， 100μl。

（2）執(zhí)行稱重（每個體積點重復(fù)10次測量）：

a、將天平歸零，放上裝有少量水的稱量容器（用于增加濕度，減少蒸發(fā)）。

b、對目標(biāo)通道安裝新吸頭，預(yù)潤濕（吸放液體3次）。

c、吸取設(shè)定體積的水。

d、將吸頭頂部以特定角度（通常15-30度） 浸入稱量容器液面以下約1-2mm，緩慢、勻速地排液，等待約1秒后，沿容器內(nèi)壁滑出（確保排盡，不掛滴）。

e、立即蓋上防風(fēng)罩，記錄天平穩(wěn)定后的讀數(shù)（mg）。

f、記錄當(dāng)時的水溫（精確到0.1°C）。

g、清空、擦干容器，天平歸零，重復(fù)步驟b-f，共10次。

三、調(diào)節(jié)（僅在校準(zhǔn)失敗后進(jìn)行）

調(diào)節(jié)需要專用工具（通常隨新移液器附帶或可單獨訂購），且要求操作者有一定經(jīng)驗。不當(dāng)調(diào)節(jié)可能損壞移液器。

1、打開調(diào)節(jié)窗： 在移液器頂部或手柄下方找到調(diào)節(jié)孔/窗。

2、使用專用工具： 插入合適的六角扳手或調(diào)節(jié)工具。

3、調(diào)節(jié)：

（1）如果所有體積點都偏大，順時針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)螺絲。

（2）如果所有體積點都偏小，逆時針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)螺絲。

（3）微調(diào)原則： 每次只旋轉(zhuǎn)1/8圈（45度）左右，然后重新測試中間量程的體積。反復(fù)微調(diào)，直至該點準(zhǔn)確。

（4）調(diào)好中間點后，必須重新檢查最小和MAX量程點，因為三點可能無法線性。理想情況下，三點應(yīng)都達(dá)標(biāo)。

4、鎖定： 調(diào)節(jié)完畢后，確保調(diào)節(jié)窗關(guān)閉或鎖緊。

四、記錄與報告

1、記錄所有原始數(shù)據(jù)、計算結(jié)果、環(huán)境條件、操作人員、日期。

2、明確給出校準(zhǔn)結(jié)論（合格/不合格）。

3、如果進(jìn)行了調(diào)節(jié)，記錄調(diào)節(jié)前后的數(shù)據(jù)。

4、為移液器貼上標(biāo)簽，注明下次校準(zhǔn)日期（通常建議每6-12個月校準(zhǔn)一次，高頻使用需縮短周期）。

五、注意事項與提示

1、動作標(biāo)準(zhǔn)化： 操作者的移液節(jié)奏和角度必須一致，這是保證精密度（CV）的關(guān)鍵。

2、蒸發(fā)是誤差來源： 動作要迅速，使用帶濾芯吸頭、容器內(nèi)保持高濕度環(huán)境。

3、Research plus特性： 該系列具有量程鎖定功能，校準(zhǔn)時請確認(rèn)鎖定狀態(tài)。其8通道移液器吸頭座可旋轉(zhuǎn)，請確保在垂直位置校準(zhǔn)。

4、若多通道均不合格： 如果一致性差且多通道校準(zhǔn)失敗，可能是移液器內(nèi)部密封圈磨損或活塞污染，建議直接聯(lián)系艾本德進(jìn)行專業(yè)維修和全面校準(zhǔn)。